羥自由基清除能力測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

測(cè)定原理：

H2O2/ Fe2+ 通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應(yīng)生成有色物質(zhì)2，3-二羥基苯甲酸，在510nm處有最大吸收峰，加入具有清除能力的物質(zhì)后，有色物質(zhì)便會(huì)減少，從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。

自備實(shí)驗(yàn)用品：

恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

苯丙諾龍/苯丙去甲ELISA試劑盒 NP免費(fèi)代測(cè)試劑

本周蛋白ELISA試劑盒 BJP免費(fèi)代測(cè)試劑

胞質(zhì)動(dòng)力蛋白ELISA試劑盒 CD免費(fèi)代測(cè)試劑

胞漿型磷脂酶A2-αELISA試劑盒 cPLA2-α免費(fèi)代測(cè)試劑

胞漿免疫球蛋白ELISA試劑盒 CIg免費(fèi)代測(cè)試劑

伴侶蛋白10ELISA試劑盒 CPN10免費(fèi)代測(cè)試劑

半乳糖ELISA試劑盒 Galactose免費(fèi)代測(cè)試劑

半胱氨酰白三烯ELISA試劑盒 CysLTs免費(fèi)代測(cè)試劑

板層素相關(guān)多肽2亞型αELISA試劑盒 TMPO免費(fèi)代測(cè)試劑

瘢痕性天皰瘡抗體ELISA試劑盒 CP免費(fèi)代測(cè)試劑

百日咳毒素ELISA試劑盒 PT免費(fèi)代測(cè)試劑

百日咳病毒抗體ELISA試劑盒 IgA免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞酯酶ELISA試劑盒 LE免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞調(diào)節(jié)素ELISA試劑盒 LR免費(fèi)代測(cè)試劑

白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4ELISA試劑盒 LILRB4免費(fèi)代測(cè)試劑
羥自由基清除能力測(cè)試盒類胡蘿卜素(carotenoid)含量測(cè)試盒50管/48樣分光光度法

二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）測(cè)試盒100管/96樣 微量法

二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法

二磷核酮糖羧化酶（Rubisco）測(cè)試盒25管/24樣 紫外分光光度法

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測(cè)試盒100管/96樣 微量法

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法

3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測(cè)試盒25管/24樣 紫外分光光度法

果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶測(cè)試盒100管/96樣 微量法

果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶測(cè)試盒50管/48樣 紫外分光光度法
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。