elisa試劑盒白介素類同位素技術(shù)工作應(yīng)用原理
與普通照相的曝光、顯影、定影原理相似,此法是elisa試劑盒白介素類利用放射性同位素所放出之射線使照相乳膠“感光”,再經(jīng)顯影和定影處理,將乳膠中因受輻照而致敏的鹵化銀顆粒還原成金屬銀,洗去未“感光”的鹵化銀后則圖像自然顯示出來(lái)。圖像中任何區(qū)域的黑度取決于留存的金屬銀的量,它反映了射線在這個(gè)區(qū)域所沉積的能量。這種方法以照相乳膠或核乳膠(鹵化銀顆粒更細(xì))作為“儀器”,記錄、檢查和測(cè)量整體和組織、細(xì)胞和亞細(xì)胞水平中放射性示蹤物的分布、進(jìn)行定性和半定量測(cè)定,稱為放射自顯影法。由于放射性物質(zhì)往往在研究對(duì)象中呈不均勻分布,因此可利用一系列不同的圖像判斷放射性物質(zhì)在組織或細(xì)胞中的動(dòng)態(tài)關(guān)系,從而揭示的代謝動(dòng)態(tài)過(guò)程,所以這種實(shí)驗(yàn)技術(shù)以其*的功效從放射性被發(fā)現(xiàn)至今仍一直被廣泛使用。
目前常用的自顯影方法有以下幾種類型:①接觸法,zui簡(jiǎn)單的一種,一般利用照相膠片或 X光膠片,使含有放射性物質(zhì)的標(biāo)本表面與膠片上的乳膠層表面緊密接觸,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間“曝光”后,將標(biāo)本與膠片分開,膠片經(jīng)過(guò)顯影、定影等處理后即可得到自顯影圖像。此法的分辨率受膠片上乳膠層的厚度及顆粒大小的限制,一般為10~30微米,elisa試劑盒白介素類適用于小的動(dòng)、植物整體標(biāo)本,大體解剖學(xué)的和組織學(xué)的切片以及薄層、紙層和電泳圖譜的自顯影等;②液體乳膠法,目前應(yīng)用較廣泛的一種。一般是將液體乳膠直接涂布到載玻片的組織切片上,“曝光”后連同標(biāo)本一起進(jìn)行顯影、定影、沖洗和染色,并zui后封固在一起。此法的分辨率可達(dá)1~10微米,可進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位;③電鏡自顯影法,是放射自顯影與電子顯微鏡相結(jié)合的一種新技術(shù)。需使用顆粒均勻、大小適中、密度一般為1013銀顆粒/厘米3的核乳膠。含有標(biāo)記物質(zhì)的樣品需制成超薄切片,切片可以撈在帶支持膜的銅網(wǎng)上或載玻片上。
elisa試劑盒白介素類采用浸涂法、環(huán)套法或泡蓋法等使乳膠形成一單晶體層敷蓋在切片上,再經(jīng)“曝光”、沖洗和染色等處理。此法的分辨率可達(dá)0.05~0.1微米,能分辨DNA分子的一條鏈,故又稱為“分子自顯影法”。 活化分析法 當(dāng)穩(wěn)定性核素受到中子、帶電粒子或高能光子的轟擊后,可轉(zhuǎn)變成放射性的核素。測(cè)量產(chǎn)物所放出之射線,可定量地測(cè)出原樣品中某一種或幾種元素的含量。利用這種原理檢測(cè)樣品中的痕量元素或微量樣品中的化學(xué)組成的技術(shù)稱為活化分析法。用于活化分析的輻射源可以是慢中子、快中子、質(zhì)子、氘子、氚子、α粒子、高能的X射線或γ射線等,其中應(yīng)用zui多的是中子,特別是慢中子。